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PROGEN Endonuclease ELISA-核酸內(nèi)切酶酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)說明書

更新時(shí)間:2025-09-24      點(diǎn)擊次數(shù):508

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核酸內(nèi)切酶水平的快速簡便定量

PROGEN 核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒是一種高靈敏度檢測方法,專為體外檢測粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)來源的核酸內(nèi)切酶(包括 DENARASE®)及含 DENARASE® 的樣品而設(shè)計(jì)。

該檢測方法可用于多種工藝來源的樣品,包括腺相關(guān)病毒(AAV)基因治療載體生產(chǎn)過程中的樣品。在 AAV 純化過程中,會添加核酸酶以降解多余的 DNA 雜質(zhì)。然而,不受控的核酸酶活性可能會破壞關(guān)鍵成分(如 AAV 載體基因組和質(zhì)粒 DNA),導(dǎo)致產(chǎn)量降低、純度下降,更重要的是可能影響最終基因治療產(chǎn)品的安全性和治療效果。因此,常規(guī)監(jiān)測核酸內(nèi)切酶水平對于保障產(chǎn)品完整性和維持治療效果至關(guān)重要。


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檢測原理

該核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒采用微孔板形式進(jìn)行雙抗夾心 ELISA 檢測,具體流程如下:

微孔板的孔中包被有特異性單克隆捕獲抗體,用于捕獲樣品(如細(xì)胞裂解液或純化病毒制劑)中存在的粘質(zhì)沙雷氏菌來源的核酸內(nèi)切酶。捕獲的核酸內(nèi)切酶通過兩步法進(jìn)行檢測:

1.生物素偶聯(lián)的單克隆檢測抗體(抗體偶聯(lián)物)與固定化的核酸內(nèi)切酶結(jié)合。

2.鏈霉親和素 - 過氧化物酶偶聯(lián)物(HRP 偶聯(lián)物)與生物素分子結(jié)合。

加入底物溶液(TMB,四甲基聯(lián)苯胺)后會發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與孔中分析物(核酸內(nèi)切酶)的濃度成正比。通過光度法在 450 nm 波長下(參比波長為 620–690 nm)測量吸光度。未知樣品中的核酸內(nèi)切酶濃度可根據(jù)相應(yīng)的 DENARASE® 標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出。


為何選擇本核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒?

即用型:提供預(yù)包被微孔板及所有必需試劑

超高靈敏度檢測:由高特異性單克隆抗體實(shí)現(xiàn),靈敏度高于競品試劑盒

省時(shí)高效:檢測時(shí)間縮短約一半,總孵育時(shí)間約 2 小時(shí)

寬動態(tài)范圍:32 pg/ml 至 1000 pg/ml(450 nm 波長處吸光度值)

 檢測限(LOD):4 pg/ml

定量限(LOQ):12 pg/ml


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AAV5 Titration ELISA

96T

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250ul

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610178

anti-AAV9, ADK9-1R, mouse recombinant ab

50ug

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Hyperphage M13 K07ΔpIII

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AAV6 Titration ELISA

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PROGEN

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anti-AAV2, A20, mouse recombinant ab

50ug

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AAV2 empty capsids

100ul

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50ug

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PRAAV1

AAV1 Titration ELISA

96T

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690058S

anti-AAV VP1/VP2/VP3 mouse monoclonal, B1 sample size

200ul(50ug/ml)

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AAV8 empty capsids

100ul

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610148

anti-AAV-5, ADK5a, mouse mab

50ug

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anti-AAV VP1/VP2/VP3, B1, mouse mab

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